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固定化胃蛋白酶(瓊脂糖樹脂) 貨號: 20343

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Thermo Scientific Pierce 固定化胃蛋白酶瓊脂糖由酸性肽鏈內切酶(胃蛋白酶)組成,該酶固定在微珠狀瓊脂糖樹脂上用于從抗體中生成和純化 Fab 和 F(ab')2 片段。

胃蛋白酶是一種在脊椎動物胃粘膜層中以非活性前體形式(胃蛋白酶原)生成的非特異性酸性肽鏈內切酶。有幾種胃蛋白酶,每種分子量為 35,000,最佳 pH 值為 1-3;pH 值為 > 6 時,該酶被永久滅活。胃蛋白酶具有廣泛的底物特異性。它優(yōu)先在芳香族氨基酸(比如苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸)羧基處裂解蛋白。它不會在含有纈氨酸、丙氨酸或甘氨酸的鍵處裂解。在其他殘基處的裂解效率不同。

胃蛋白酶和其他蛋白水解酶用于各種蛋白的實驗室分析。胃蛋白酶和木瓜蛋白酶通常用于生成抗體片段。木瓜蛋白酶用于將抗體裂解成含有單個抗原結合結構域的 Fab 片段。胃蛋白酶通過僅去除鉸鏈區(qū)以外的 Fc 結構域部分產生 F(ab')2 片段。生成的 F(ab')2 片段包括兩個由鉸鏈區(qū)二硫化物結合的抗體結合 Fab 片段。

固定化胃蛋白酶可以在任何應用中代替游離胃蛋白酶,且具有優(yōu)勢,因為它幾乎無需自溶、消除了蛋白酶樣品的污染,還可以通過去除胃蛋白酶來控制酶切。固定化胃蛋白酶還能夠更加穩(wěn)定地抵抗熱誘導的變性,從而延長活性維持時間。F(ab')2 制備試劑盒包含固定化胃蛋白酶、其他必要試劑和用于人、兔和小鼠抗體酶切的優(yōu)化方案。

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